丙肝病毒的檢查方法有哪些?

確定丙肝患者的病毒含量才能夠更好的確認(rèn)治療方案和用藥進(jìn)度,所以選取適合自己的丙肝病毒檢查是最重要的。ELISA是丙肝檢測中常用的檢測手段,但是ELISA其實并不是十分可靠的方法,容易造成許多假陽性,確診要用RNA測定,造成這種現(xiàn)象的原因是什么呢?
1、抗原
檢測抗HCV抗體的間接ELISA和CLIA試劑所用的抗原為基因工程法制備的融合蛋白,所包含的來自表達(dá)載體大腸埃希菌等的一些序列可與血清中抗大腸埃希菌的因子發(fā)生反應(yīng)而產(chǎn)生假陽性結(jié)果;在合成肽制備過程中,如果某些肽序列錯誤,會導(dǎo)致合成肽特異性改變而產(chǎn)生假陽性;利用大腸埃希菌大規(guī)模表達(dá)后經(jīng)破碎細(xì)胞、鹽析、離子交換柱等分離純化步驟得到的HCV重組抗原,如果純度達(dá)不到100%,經(jīng)過大腸埃希菌感染的血清可與抗原中雜蛋白產(chǎn)生反應(yīng)而引起假陽性。
2、血清IgG濃度
人血清中IgG的濃度對間接ELISA抗HCV抗體檢測效果有較大的影響,酶標(biāo)的第二抗體能與人所有IgG結(jié)合,而IgG吸附于板孔的能力很強(qiáng),雖然10ul反應(yīng)血清采用100ul緩沖液稀釋以降低本底,但在某些血清IgG水平偏高的受檢者仍有可能出現(xiàn)弱陽性。
3、結(jié)締組織病
結(jié)締組織病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、MM等病癥時,血清中的風(fēng)濕小體和其他異常IgG(IgG濃度達(dá)到50mg/ML)會引起本底升高或假陽性。
4、溶血
溶血時釋放到血清中的血紅蛋白具有過氧化物酶的性質(zhì),當(dāng)其通過吸附或“PP效應(yīng)”(蛋白質(zhì)間相互吸附的現(xiàn)象)相互結(jié)合后,可催化A、B液顯色而造成假陽性。
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